پیشگیری از بیان ژن vegfr-۱ در محیط کشت، با استفاده از به کارگیری sirna اختصاصی در درمان نئوواسکولاریزاسیون چشم

نویسندگان

علی زارعی محمودآبادی

ali zarei mahmud abadi biochemistry department& chemical damage research center, baghiyatallah university of medical science, tehran, iran.گروه بیوشیمی و مرکز تحقیقات آسیب های شیمیایی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله(عج)، تهران، ایران. معصومه معصومی کریمی

masoomeh masoomi karimi , immunology department, torbateheydariyeh university of medical science. torbateheydariyeh, iranگروه ایمونولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تربت حیدریه، تریت حیدریه، ایران. مجید بهابادی

majid bahabadi biochemistry department, baghiyatallah university of medical science, tehran, iranگروه بیوشیمی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله(عج)، تهران، ایران. مهدی کمالی

mahdi kamali nano-biotechnology research center, baghiyatallah university of medical science, tehran, iranمرکز تحقیقات نانوبیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله(عج)، تهران، ایران. رضا کوشکی

چکیده

زمینه و هدف: آنژیوژنز، از مهمترین فرایندهای زیستی است که هر گونه اختلال در آن، به بیماری منجر می شود. نقطه اصلی در هدایت سیگنالینگ این فرایند، فاکتور رشد اندوتلیال عروقی است که از طریق رسپتورهایش اعمال اثر می کند. مطالعه حاضر، در جهت مهار بیان رسپتور تیپ і این فاکتور (vegfr-1)، با استفاده از sirna اختصاصی در محیط کشت، به منظور استفاده از تأثیر مهاری آن در درمان نئوواسکولاریزاسیون چشم صورت گرفته است. روش تحقیق: در این مطالعه تجربی، ابتدا با استفاده از توالی ژن هدف، توالی های sirna اختصاصی، علیه آن طراحی، blast و ساخته شد. از طرف دیگر، cdna سلولhuvec، سنتز و ژن هدف، با کمک پرایمر اختصاصیvegfr1 و pcr، به میزان مورد نیاز تکثیر شد؛ سپس در وکتور بیانی pefgp-n1، کلون و تأیید شد. پلاسمید ناقل حاصل، با استفاده از لیپوفکتامین، به سلول hela که فاقد بیان ژن هدف بود، انتقال داده شد. میزان بیان gfrدر وکتور اولیه و وکتور کلون شده، در حضور و عدم حضور sirna اختصاصی علیهvegfr1 مورد ارزیابی قرار گرفت و میزان مهار ژن، از طریق ارزیابی کاهش فلورسانس سبز رنگ ناشی از gfp، وسترن بلات و rt-pcr مورد بررسی قرار گرفت. نتایج، با استفاده از آزمون تی تست، مورد آنالیز قرار گرفت و 05/0p< معنی دار در نظر گرفته شد. یافته ها: فلورسانت ناشی از اثر sirna در گروه هدف در مقایسه با گروه کنترل کاهش داشت sds page و وسترن بلاتینگ از سلول حاوی وکتور مواجهه یافته با هر دو نوع sirna، کاهش میزان پروتئین را نشان داد. نتایج حاصل از دو sirna به کاررفته، بیانگر کاهش بیان ژن در سطح رونویسی و ترجمه در مقایسه با گروه کنترل بود (05/0p<). نتیجه گیری: sirna اختصاصی طراحی شده علیه vegfr-1، با استفاده از لیپوفکتامین، به طور مناسب به داخل سلول منتقل و از بیان رسپتور، به طور معنی دار جلوگیری نمود؛ لذا احتمالاً به عنوان یک فاکتور مناسب درمانی جدید، در جلوگیری و یا کاهش نئوواسکولاریزاسیون در چشم، مطرح باشد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

پیشگیری از بیان ژن VEGFR-1 در محیط کشت، با استفاده از به‌کارگیری siRNA اختصاصی در درمان نئوواسکولاریزاسیون چشم

Background and Aim: Angiogenesis is one of important biological processes any disruption in which leads to disease. The main signaling factor in this process is VEGF which acts through its receptors. The present study was done in order to inhibit the expression of receptor type1of this factor (VEGFR-1) using specific siRNA in the culture medium to use its inhibitory effect on neovascularization...

متن کامل

مهار موقت بیان ژن vegfr۲ با استفاده از sirna اختصاصی در محیط کشت

مقدمه: استفاده از sirna برای خاموش سازی بیان ژن ها امروزه در حال گسترش است. از جمله اهداف این تکنولوژی؛ جلوگیری از بیان عامل رشد اندوتلیال عروقی است. مطالعه حاضر به منظور جلوگیری بیان گیرنده تیپ ii این عامل ( vegfr-2: vascular endothelial growth factor receptor ii ) با استفاده از sirna ی اختصاصی در محیط کشت صورت گرفته است. مواد و روش ها: ابتدا با استفاده از توالی ژن هدف، توالی های sirna ی اختصا...

متن کامل

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

مقایسه تأثیر وضعیت طاق باز و دمر بر وضعیت تنفسی نوزادان نارس مبتلا به سندرم دیسترس تنفسی حاد تحت درمان با پروتکل Insure

کچ ی هد پ ی ش مز ی هن ه و فد : ساسا د مردنس رد نامرد ي سفنت سرتس ي ظنت نادازون داح ي سکا لدابت م ي و نژ د ي سکا ي د هدوب نبرک تسا طسوت هک کبس اـه ي ناـمرد ي فلتخم ي هلمجزا لکتورپ INSURE ماجنا م ي دوش ا اذل . ي هعلاطم ن فدهاب اقم ي هس عضو ي ت اه ي ندب ي عضو رب رمد و زاب قاط ي سفنت ت ي هـب لاتـبم سراـن نادازون ردنس د م ي سفنت سرتس ي لکتورپ اب نامرد تحت داح INSURE ماجنا درگ ...

متن کامل

انتقال siRNA به سرطان ریه با استفاده از نانوذرات

سرطان ریه شایع ترین علت مرگ و میر ناشی از سرطان در جهان می باشد و سالانه بیشتر از یک میلیون نفر به علت ابتلا به این بیماری جان خود را از دست می دهند. این سرطان به دو گروه اصلی به نام های سرطان ریه با سلول های غیر کوچک (NSCLC) و سرطان ریه با سلول های کوچک (SCLC) تقسیم می شود این دو گروه در خصوصیات بسیاری از جمله رفتارهای بیولوژیک، پاسخ به درمان و تغییرات ژنتیکی متفاوت هستند. مقاومت به درمانهای م...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بیرجند

جلد ۱۹، شماره ۳، صفحات ۲۵۵-۲۶۵

کلمات کلیدی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023